پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

كوآنزیم
ایزوپرنوئیدها
تركیبات آلی
دكاپرنیل دی فسفات سنتاز
آگروباكتریوم تومی فاسینس
ردوباكتر اسفروئیدس
دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم
دانلود پایان نامه كوآنزیم

رفتن به سایت اصلی

دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

 

 

چكیده:

ایزوپرنوئیدها از بزرگترین تركیبات آلی در طبیعت بوده كه دارای نقشهای گوناگون بیولوژیكی در بدن موجودات زنده از جمله انسان می باشند، از اینرو این تركیبات از اهمیت بسیار بالایی از نظر پزشكی و غذایی و حتی دارویی برخوردار هستند. از جمله مهمترین این تركیبات می توان به یوبی كینونها اشاره نمود كه هنگام تنفس سلولی در زنجیره انتقال الكترون دارای نقش بسیار مهمی می باشند. این تركیبات هموپلیمرهایی از واحدهای ایزوپرنی به نام ایزوپنتیل پیرو فسفات (IPP) با ویژگی های ساختاری و فیزیكوشیمیایی مختلف هستند.

 

دو آنزیم “فارنزیل دی فسفات سنتاز” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” مسئول بیوسنتز دو تركیب “فارنزیل دی فسفات” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات” كه به ترتیب هر كدام از 3 و 4 واحد ایزوپرنی تشكیل شده اند. این تركیبات می توانند به عنوان سوبسترا جهت سنتز دیگر تركیبات ایزوپرنوئیدی و از جمله كوآنزیم Q10 مورد استفاده قرار گیرند.در این مطالعه، تاثیر بیان ژنهای کد کنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با دیگرآنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی آنزیم “دکاپرنیل دی فسفات سنتاز” ( آنزیم مسئول ساخت زنجیرهء ایزوپرنوئید كوآنزیم Q10 ) و در نهایت تولید كوآنزیم Q10 در سویه های نوتركیب باكتری “اشرشیاكلی ” مطالعه می گردد.

 

 

کلمات کلیدی:

Coenzyme

كوآنزیم

ایزوپرنوئیدها

تركیبات آلی

دكاپرنیل دی فسفات سنتاز

آگروباكتریوم تومی فاسینس

ردوباكتر اسفروئیدس

 

 

 

 

 

مواد و روشها:

در این پژوهش ژنهای هترولوگوس كد كننده آنزیم “دكاپرنیل دی فسفات سنتاز” (dds) از دو گونهء باكتریایی “آگروباكتریوم تومی فاسینس” (atdds) و “ردوباكتر اسفروئیدس” (rsdds) استخراج شده و بوسیلهء دو پلاسمید جداگانه به درون باكتری اشرشیاكلی سویه DH5α كلون گردیدند كه نتیجهء آن ایجاد توانایی تولید كوآنزیم Q10 در این باكتری بود. در ادامه میزان تولید این تركیب در سلولهای نو تركیب حاصله با دستگاه HPLC مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

به منظور مطالعه اثر آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با  دیگر آنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی تولید كوآنزیم Q10 نیز؛ ژنهای مربوطه ( crtE, crtB, crtI ) از باكتری “اروینیا هربیكولا” استخراج شده و بوسیله پلاسمیدهای جداگانه به درون سلولهای نوتركیب اشرشیاكلی تولید كنندهء كوآنزیم Q10 كلون گردیدند. سلولهای نوتركیب حاصله در محیط كشت “2YTG” در دمای 30 درجه سانتی گراد كشت داده شدند و سپس تولید كوآنزیم Q10 در هر سلول مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

نتایج:

بیان دو ژن atdds و rsdds در باكتری اشرشیاكلی با شناسایی پیك كوآنزیم Q10 توسط دستگاه HPLC مورد تائید قرار گرفت. بطور كلی برای شناسایی و اندازه گیری كوآنزیم Q ها از یك شناساگر اشعهء UV در طول موج 275 نانومتر استفاده می شود.به منظور اندازه گیری غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب نیز از منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 استفاده گردید.نتایج بدست آمده نشان داد كه بیان ژن كدكنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی در باكتری نوتركیب اشرشیاكلی كه حاوی یكی از دو ژن atdds و یا rsdds می باشد ، افزایش چشمگیری در میزان تولید كوآنزیم Q10 ایجاد نمی نماید و حتی در بعضی موارد منجر به كاهش تولید نیز می گردد.

 

از طرف دیگر بیان ژن كدكننده آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” همراه با بیان ژهای كدكنندهء آنزیم های “فیتوئن سنتاز” و “فیتوئن دساتوراز” ، كه همگی در مسیر بیوسنتز لیكوپن وجود دارند، منجر به مشاهدهء نتایج متفاوتی در میزان تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب حاوی atdds و یا rsdds شده است. بطوریكه بیان ژنهای كدكنندهء مسیر بیوسنتز لیكوپن زمانی كه با ژن atdds همراه هستند، اثر قابل توجهی در میزان تولید كوآنزیم Q10 نمی گذارند، در حالیكه وقتی این ژنها با ژن rsdds همراه می شوند منجر به افزایش چشمگیری در تولید این تركیب می گردند.

 

 

 

 

فهرست مطالب

چكیده

فصل اول (كلیات) 1

1.مقدمه : 2

2.تاریخچه كوآنزیم Q10: 3

3.بررسی ساختمان كوآنزیم Q: 3

4.  بررسی واکنشهای اکسیداسیون و احیاء در كوآنزیم Q10 : 5

5.مسیر بیوسنتز” كوآنزیم Q10 : 7

5-1 مسیر سنتز زنجیرهء ایزوپرنوئیدی: 10

5-2 ساخت حلقهء یوبی كینونی: 11

5-3 اتصال حلقه به زنجیرهء ایزوپرنوئیدی و تغییرات بعدی آن: 11

6.بررسی آنزیم های کلیدی در مسیر سنتز کوآنزیمQ10  : 15

7. تاثیر مسیر بیوسنتز ایزوپرنوِِئیدها برروی تولید یوبی كینون ها: 22

7-1 مسیر بیوسنتز لیكوپن: 23

8.نقص كوآنزیم Q10 : 26

9.نقش كوآنزیم Q10 : 27

10 اثرات داروهای استاتینی بر روی بیوسنتز كوآنزیم Q10: 37

11 اهداف پژوهش : 40

12. استراتژی پژوهش : 41

13. نكات مهم پژوهش : 49

 

فصل دوم (مواد و روشها) 51

◙ مواد مورد استفاده در این پژوهش: 52

1 اسامی ژن های مورد استفاده: 52

اسامی پلاسمید های مورد استفاده: 52

3 آنزیم های مورد استفاده: 53

4 دستگاههای مورد استفاده در این پژوهش: 53

5 كیت های مورد استفاده در این پژوهش: 56

6 مواد ومحلول های مورد استفاده در این پژوهش : 57

◙ روش ها: 60

1. تهیه انواع محیط كشت: 60

2. استفاده از انواع آنتی بیوتیك ها در محیط های كشت : 63

3. تهیه سلول مستعد: 64

4. انتقال ژن خارجی به سلول های مستعد : 67

5. تكنیك PCR: 69

6 الكتروفورز با ژل آگارز : 73

7. خالص سازی ژن از ژل آگارز : 79

8 استفاده از آنزیم های برش دهنده: 81

9. خالص سازی نمونه DNA از آنزیم های موجود در محیط واكنش: 84

10 استخراج پلاسمید : 85

11. استخراج كوآنزیم Qاز باكتری تولید كننده: 88

12. محاسبه وزن خشك سلول : 91

13. دستگاه “pH متر”: 92

14. دستگاه “اسپكتروفتومتر” : 93

.15. دستگاه تبخیر كننده: 94

16 كروماتوگرافی “HPLC”: 94

 

فصل سوم (نتایج) 98

1.ساخت پلاسمیدهای نوترکیب: 99

1-1. ساخت پلاسمید “pDcrtE” 99

1-2. ساخت پلاسمید “pTcrtE” : 107

1-3. ساخت پلاسمید “pTlycm3” 110

1-4.ساخت پلاسمید “pBrsdds” : 118

1-5. تکثیر پلاسمید “pBatdds” 126

2. ساخت سلولها: 127

2-1  ساخت سلول E.coli-Ba: 128

2-2  ساخت سلول E.coli-Br: 129

2-3 ساخت سلول E.coli-BaDc: 129

2-4. ساخت سلول E.coli-BrDc: 129

2-5. ساخت سلول E.coli-BaTc: 129

2-6. ساخت سلول E.coli-BrTc: 130

2-7. ساخت سلول E.coli-BaTl: 130

2-8. ساخت سلول E.coli-BrTl: 130

3 اندازه گیری كوآنزیمQ10 سنتز شده در سلولهای نوتركیب: 130

3-1 انتقال سلول ها به محیط كشت : 131

3-2 استخراج كوآنزیم  Qسنتز شده از سلول های نوترکیب: 133

3-3 اندازه گیری كوآنزیم Q با روش كروماتوگرافی “HPLC” : 133

4.نتایج و یافته ها : 141

5 بحث و بررسی : 146

6. پیشنهادات: 150

 

فصل چهارم (منابع) 151

منابع انگلیسی : 152

منابع فارسی: 162

 

 

 

فهرست تصاویر

فصل اول

تصویر شماره 1-1 شمای ساختار انواع كوآنزیم Q ………………………………………………………….3

تصویر شماره 1-2 شمای ساختار كوآنزیم Q3 ……………………………………………………………….4

تصویر شماره 1-3 شمای ساختار سمی كینون ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-4 شمای ساختار یوبی كینول ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-5 سیكل كوآنزیم Q …………………………………………………………………………..6

تصویر شماره 1-6 شمای مسیر موالونات و غیر موالونات تا سنتز كوآنزیم Q10………………………….9

تصویر شماره 1-7 شمای ساخت حلقه یوبی كینونی …………………………………………………………..11

تصویر شماره 1-8 مسیر سنتز كوآنزیم Q10 …………………………………………………………………12

تصویر شماره 1-9 مراحل بیوسنتز كوآنزیم Q در باكتری “اشرشیاكلی” و مخمر “ساكارومایسس سرویزیه”…..13

تصویر شماره 1-10 مسیر بیوسنتز لیكوپن…………………………………………………………………….25

تصویر شماره 1-11 زنجیره انتقال الكترون در یوكاریوتها…………………………………………………..29

تصویر شماره 1-12 شمای نقش كوآنزیم Q10 در شكل گیری باند دی سولفیدی …………………………..30

تصویر شماره 1-13 شمای نقش كوآنزیم Q10 به عنوان عامل اكسید كننده سولفید…………………………31

تصویر شماره 1-14 شمای ارتباط مسیر سنتز كوآنزیم Q با مسیر سنتز كلسترول…………………………38

تصویر شماره 1-15 شمای پلاسمید pBBR1MCS2……………………………………………………….43

تصویر شماره 1-16 شمای پلاسمید pBAD24 ………………………………………………………………44

تصویر شماره 1-17 شمای عملكرد پروموتور آرابینوز در وكتور pBAD24……………………………..46

تصویر شماره 1-18 شمای پلاسمید pTrc99A ……………………………………………………………..46

فصل دوم

تصویر شماره 2-1 تصویر محیط كشت جامد موجود در plate …………………………………………….60

تصویر شماره 2-2 دستگاه PCR ……………………………………………………………………………..69

تصویر شماره 2-3 دستگاه الكتروفورز ……………………………………………………………………….73

تصویر شماره 2-4 دستگاه pH متر…………………………………………………………………………….92

تصویر شماره 2-5 دستگاه اسپكتروفتومتر……………………………………………………………………..93

تصویر شماره 2-6 دستگاه تبخیر كننده ………………………………………………………………………..94

تصویر شماره 2-7 دستگاه HPLC ……………………………………………………………………………95

فصل سوم

تصویر شماره 3-1 توالی ژن crtE …………………………………………………………………………..100

تصویر شماره 3-2 شمای مراحل ساخت پلاسمید pDcrtE …………………………………………………101

تصویر شماره 3-3 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBAD24 ……………………………………….101

تصویر شماره 3-4 شمای دو پرایمر برگشتی و پیشرونده برای تكثیر ژن crtE …………………………..103

تصویر شماره 3-5 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن crtE ………………………………………………….103

تصویر شماره 3-6 پلاسمید خطی شده pBAD24 ……………………………………………………………104

تصویر شماره 3-7 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pDcrtE ……105

تصویر شماره 3-8 شمای پلاسمید pDcrtE ………………………………………………………………….106

تصویر شماره 3-9 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pDcrtE………………………………….106

تصویر شماره 3-10 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTcrtE ……………………………………………….107

تصویر شماره 3-11 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrc99A …………………………………….107

تصویر شماره 3-12 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A …………………………108

تصویر شماره 3-13 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTcrtE …..109

تصویر شماره 3-14 شمای پلاسمید pTcrtE ………………………………………………………………..109

تصویر شماره 3-15 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTcrtE ………………………………..110

تصویر شماره 3-16 توالی ژن crtB …………………………………………………………………………111

تصویر شماره 3-17 توالی ژن crtI …………………………………………………………………112 و 113

تصویر شماره 3-18 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………..113

تصویر شماره 3-19 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTlycm4 ……………………………………..114

تصویر شماره 3-20 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن موجود در پلاسمید pTlycm4 ………………….115

تصویر شماره 3-21 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن جدا شده از پلاسمید pTlycm4 …………………115

تصویر شماره 3-22 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTlycm4…116

تصویر شماره 3-23 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A پس از خالص سازی …117

تصویر شماره 3-24 شمای پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………………………..117

تصویر شماره 3-25 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTlycm3 ……………………………..118

تصویر شماره 3-26 توالی ژن rsdds ……………………………………………………………………….119

تصویر شماره 3-27 شمای مراحل ساخت پلاسمید pBrsdds ……………………………………………..120

تصویر شماره 3-28 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrsdds ……………………………………..121

تصویر شماره 3-29 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds جدا شده از پلاسمید pTrsdds ……………122

تصویر شماره 3-30 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds خالص سازی شده ………………………….122

تصویر شماره 3-31 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBBR1MCS2 ……………………………..123

تصویر شماره 3-32 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 ………………….124

تصویر شماره 3-33 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 خالص سازی شده………124

تصویر شماره 3-34 شمای پلاسمید pBrsdds ……………………………………………………………….125

تصویر شماره 3-35 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pBrsdds ………………………………..125

تصویر شماره 3-36 توالی ژن atdds ……………………………………………………………………….126

تصویر شماره 3-37 شمای پلاسمید pBatdds ………………………………………………………………127

تصویر شماره 3-38 شمای مراحل ساخت سلولهای نوتركیب …………………………………………………128

تصویر شماره 3-39 پیك مربوط به كوآنزیم Q10 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ……….135

تصویر شماره 3-40 پیك مربوط به كوآنزیم Q8 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-41 پیك مربوط به كوآنزیم Q9 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-42 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………137

تصویر شماره 3-43 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………147

 

 

فهرست جداول

فصل اول

جدول شماره 1-1 انواع ژنهای كد كننده مسیر بیوسنتز كوآنزیم Q در “اشرشیاكلی” و “ساكارومایس سرویزیه”…..15

جدول شماره 1-2 انواع آنزیم های “پلی پرنیل دی فسفات سنتاز”……………………………………………..16

فصل دوم

جدول شماره 2-1 نام ژنهای مورد استفاده به همراه ویژگی آنها ………………………………………………52

جدول شماره 2-2 نام پلاسمیدهای مورد استفاده…………………………………………………………………52

جدول شماره 2-3 نام آنزیم های برش دهنده مورد استفاده……………………………………………………..53

جدول شماره 2-4 آنتی بیوتیك های مورد استفاده……………………………………………………………….63

جدول شماره 2-5 ویژگی كامل آنزیم های برش دهنده مورد استفاده…………………………………………..83

جدول شماره 2-6 ویژگی كامل آنزیم DNA T4” لیگاز”……………………………………………………..84

فصل سوم

جدول شماره 3-1 اسامی پلاسمیدهای نوتركیب ساخته شده…………………………………………………….99

جدول شماره 3-2 اسامی سلولهای نوتركیب ساخته شده……………………………………………..127 و 128

جدول شماره 3-3 اندازه سطح زیر منحنی نمونه كوآنزیم Q10 استاندارد در غلظتهای مختلف…………..134

جدول شماره 3-4  غلظت كوآنزیم Q10 محاسبه شده در سلولهای نوتركیب ………………………137و 138

جدول شماره 3-5 وزن خشك سلولی محاسبه شده سلولهای نوتركیب……………………………….139 و 140

جدول شماره 3-6 مقدار تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب………………………………………….141

 

فهرست نمودارها

فصل سوم

نمودار شماره 3-1 منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 …………………………………………………………..135

نمودار شماره 3-2 منحنی استاندارد وزن خشك سلولی……………………………………………………….139

نمودار شماره 3-3 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pBAD24 ) در تولید كوآنزیم Q10 …………………142

نمودار شماره 3-4 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pTrc99A) در تولید كوآنزیم Q10 …………………143

نمودار شماره 3-5 اثر ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن در تولید كوآنزیم Q10 ……………………………….144

نمودار شماره 3-6 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن atdds در تولید كوآنزیم Q10…145

نمودار شماره 3-7 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن rsdds در تولید كوآنزیم Q10….145

 

فهرست معادلات

فصل اول

معادله 1-1 معادله انتقال الكترون از كوآنزیم Q10 به كمپلكس بعد از آن ……………………………………28

فصل دوم

معادله 2-1 معادله محاسبه pH ………………………………………………………………………………….92

فصل سوم

معادله 3-1 معادله محاسبه غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب………………………….140

 

 

 

 

 

 

 

 

پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی و طبقه بندی شرکت ها

پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی و طبقه بندی شرکت ها پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی معیارهای ارزیابی عملکرد مالی ارزیابی عملکرد مالی سازمان پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی شرکت ها پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی شرکتهای بیمه ارزیابی عملکرد مالی و رتبه بندی شرکت…

پروپوزال بررسی عوامل موثر بر ارزیابی مالی شرکت ها

پروپوزال بررسی عوامل موثر بر ارزیابی مالی شرکت ها پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی معیارهای ارزیابی عملکرد مالی ارزیابی عملکرد مالی سازمان پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی شرکت ها پروپوزال ارزیابی عملکرد مالی شرکتهای بیمه ارزیابی عملکرد مالی و رتبه بندی شرکت…

چارچوب نظری و پیشینه پژوهش عوامل موثر بر بحران های بانکی

چارچوب نظری و پیشینه پژوهش عوامل موثر بر بحران های بانکی مبانی نظری عوامل موثر بر بحرانهای بانكی دانلود مبانی نظری عوامل موثر بر بحرانهای بانكی پیشینه تحقیق عوامل موثر بر بحرانهای بانكی ادبیات نظری عوامل موثر بر بحرانهای بانكی…

آزادی مطبوعات در سیستم اروپایی

آزادی مطبوعات در سیستم اروپایی دانلود مقاله آزادی مطبوعات در سیستم اروپایی ابزار نظر سیاسی در مطبوعات پروندة لینگنز علیه اتریش اغتشاش در امنیت ملی توسط مطبوعات پرونده آنرور و گاردین علیه برتیانیا انتشار مطالب مغایر با اخلاقیات جامعه و…

مبانی نظری بررسی تاثیر پولشویی بر مصرف در اقتصاد ایران

مبانی نظری بررسی تاثیر پولشویی بر مصرف در اقتصاد ایران کلمات کلیدی : ابعاد مختلف پدیده پولشویی آثار اقتصادی پولشویی تاثیر پولشویی بر مصرف پیشینه خارجی پولشویی پیشینه داخلی پولشویی تاریخچه پولشویی در ایران پیشینه تحقیق در مورد پولشویی آثار…

بررسی رابطه بین کیفیت زندگی کاری و عملکرد کارکنان

بررسی رابطه بین کیفیت زندگی کاری و عملکرد کارکنان مدل ACHIEVE عملکرد کارکنان کیفیت زندگی کاری بررسی رابطه بین کیفیت زندگی کاری و عملکرد کارکنان دانلود مقالات رشته مدیریت دولتی دانلود مقالات مدیریت دولتی دانلود مقالات مدیریت رفتن به سایت…

پاورپوینت فصل هشتم کتاب مدیریت رفتار سازمانی تألیف دکتر زهرا برومند با موضوع گروه ها

پاورپوینت فصل هشتم کتاب مدیریت رفتار سازمانی تألیف دکتر زهرا برومند با موضوع گروه ها کلمات کلیدی : پاورپوینت فصل هشتم کتاب مدیریت رفتار سازمانی تألیف دکتر زهرا برومند با موضوع مدیریت تعارض سازمانی و خلاقیت پاورپوینت گروه ها فصل…

دانلود پایان نامه کارشناسی مهندسی عمران با عنوان برنامه ریزی شهری

دانلود پایان نامه کارشناسی مهندسی عمران با عنوان برنامه ریزی شهری مسکن و شهرسازی برنامه ریزی مسکن برنامه ریزی شهری نظام قطعه بندی زمین برنامه ریزی کاربری اراضی شهری دانلود پایان نامه کارشناسی مهندسی عمران با عنوان برنامه ریزی شهری…

پرسشنامه اهمیت و ارجحیت نسبت های غیر مالی

پرسشنامه اهمیت و ارجحیت نسبت های غیر مالی پرسشنامه نسبت های غیر مالی پرسشنامه اهمیت نسبت های غیر مالی دانلود پرسشنامه نسبت های غیر مالی پرسشنامه نسبت های غیر مالی بانک پرسشنامه نسبت های غیر مالی در بانک رفتن به…

  • جزوه روانشناسی کودکان استثنایی
  • جزوه روانشناسی کودکان استثنایی جزوه روانشناسی کودکان استثنایی رفتن به سایت اصلی جزوه روانشناسی کودکان استثنایی جزوه کلاسی تایپ شده بسیار منظم و درس به درس 60 صفحه pdf -  مناسب جمع بندی و  مرور امتحان پایان ترم

  • پاورپوینت استاندارد توصیف و دسترسی به منابع اطلاعاتی
  • پاورپوینت استاندارد توصیف و دسترسی به منابع اطلاعاتی کلمات کلیدی : پاورپوینت استاندارد توصیف و دسترسی به منابع اطلاعاتی تحقیق استاندارد توصیف و دسترسی به منابع اطلاعاتی مقاله استاندارد توصیف و دسترسی به منابع اطلاعاتی آشنایی استاندارد توصیف و دسترسی…

  • نظم عمومی در اجرای احکام داوری تجاری بین‌المللی
  • نظم عمومی در اجرای احکام داوری تجاری بین‌المللی احکام داوری تجاری بین‌المللی شناسایی احکام داوری تجاری بین‌المللی اجرای احکام داوری تجاری بین‌المللی نظم عمومی در داوری تجاری بین‌المللی نظم عمومی در اجرای احکام داوری تجاری بین‌المللی پایان نامه نظم عمومی…

  • مبانی نظری ارزیابی عملکرد شعب بیمه ایران با DEA
  • مبانی نظری ارزیابی عملکرد شعب بیمه ایران با DEA ارزیابی عملکرد با DEA ارزیابی عملکرد در شرکت بیمه ارزیابی عملکرد با استفاده از تحلیل پوششی داده ها مبانی نظری ارزیابی عملکرد بیمه با DEA ارزیابی عملکرد بانک با تحلیل پوششی داده…

  • عوامل تشدید کننده اعتیاد و بررسی عوامل مختلف در پیشگیری از اعتیاد با تاکید بر مذهب
  • عوامل تشدید کننده اعتیاد و بررسی عوامل مختلف در پیشگیری از اعتیاد با تاکید بر مذهب کلمات کلیدی : پایان نامه علل گرایش به اعتیاد علل گرایش جوانان و نوجوانان به اعتیاد علل و عوامل گرایش به اعتیاد عوامل تشدید…

  • پاورپوینت برچسب گذاری تغذیه ای مواد غذایی
  • پاورپوینت برچسب گذاری تغذیه ای مواد غذایی پاورپوینت برچسب گذاری تغذیه ای مواد غذایی ادعاهای تغذیه ای ادعاهای مربوط به کالری ادعاهای مربوط به قند ادعاهای مربوط به نمک ادعاهای مربوط به فیبر غذایی ادعاها در مورد چربی ادعاها در…

  • کاملترین حل المسائل تحقیق در عملیات 1 کارشناسی
  • کاملترین حل المسائل تحقیق در عملیات 1 کارشناسی کاملترین حل المسائل تحقیق در عملیات 1 کارشناسی رفتن به سایت اصلی کاملترین حل المسائل تحقیق در عملیات 1 کارشناسی مناسب دانشجویان پیام نور و دوره های فراگیر بر اساس کتاب دکتر…

  • بررسی و شناخت عوامل منجر به سازگاری در زندگی زناشوئی
  • بررسی و شناخت عوامل منجر به سازگاری در زندگی زناشوئی زندگی زناشویی دانلود پایان نامه رضایت زناشویی دانلود پایان نامه سازگاری در زندگی زناشویی شناسایی عوامل سازگاری در زندگی زناشویی بررسی و شناخت عوامل منجر به سازگاری در زندگی زناشوئی…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق هویت سازمانی 40 صفحه
  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق هویت سازمانی 40 صفحه کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه هویت سازمانی مبانی نظری هویت سازمانی پیشینه تحقیق هویت سازمانی پیشینه داخلی هویت سازمانی پیشینه خارجی هویت سازمانی پیشینه پژوهش هویت سازمانی پیشینه نظری…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق زیرساخت های پیاده سازی مدیریت دانش 164 صفحه
  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق زیرساخت های پیاده سازی مدیریت دانش 164 صفحه کلمات کلیدی : مبانی نظری مدیریت دانش پیشینه تحقیق مدیریت دانش دانلود مبانی نظری مدیریت دانش مبانی نظری استقرار مدیریت دانش مبانی نظری و پیشینه تحقیق مدیریت…

  • شرایط و ضوابط اجرای اقدامات تامینی و تربیتی
  • شرایط و ضوابط اجرای اقدامات تامینی و تربیتی اقدامات تامینی و تربیتی پایان نامه اقدامات تامینی و تربیتی اقدامات تامینی و تربیتی اطفال و نوجوانان تحقیق در مورد اقدامات تامینی و تربیتی ماهیت اقدامات تامینی و تربیتی اقدامات تامینی و…

  • ماهیت حقوقی قرارداد اختیار معامله و انطباق آن با عقود شناخته شده
  • ماهیت حقوقی قرارداد اختیار معامله و انطباق آن با عقود شناخته شده پایان نامه قرارداد اختیار معامله تعریف قرارداد اختیار معامله قرارداد اختیار معامله چیست مفهوم قرارداد اختیار معامله ماهیت قرارداد اختیار معامله از نظر حقوقی انطباق قرارداد اختیار معامله…

  • ارتباط خودکنترلی و بهزیستی روانشناختی
  • ارتباط خودکنترلی و بهزیستی روانشناختی مفهوم خودکنترلی بهزیستی روانشناختی ابعاد بهزیستی روانشناختی نظریه یادگیری اجتماعی راتر مراحل فرآیند خودكنترلی ارتباط خودکنترلی و بهزیستی روانشناختی رابطه خودکنترلی و بهزیستی روانشناختی پایان نامه خودکنترلی پایان نامه بهزیستی روانشناختی رفتن به سایت اصلی…

  • پاورپوینت تعاریف و مفاهیم و اهمیت برنامه ریزی روستایی در ایران
  • پاورپوینت تعاریف و مفاهیم و اهمیت برنامه ریزی روستایی در ایران پاورپوینت تعاریف و مفاهیم و اهمیت برنامه ریزی روستایی ایران اهمیت و ضرورت برنامه ریزی روستایی در ایران ویژگیهای جامعه روستایی ایران مبانی کلی منطقه بندی در جامعه روستایی…

  • پاورپوینت کتاب آب و هوای ایران تألیف دکتر بهلول علیجانی
  • پاورپوینت کتاب آب و هوای ایران تألیف دکتر بهلول علیجانی کلمات کلیدی : دانلود پاورپوینت کتاب آب و هوای ایران تألیف دکتر بهلول علیجانی دانلود رایگان پاورپوینت کتاب آب و هوای ایران تألیف دکتر بهلول علیجانی دانلود کتاب آب و…

  • بررسی موانع و علل تأخیر در رسیدگی پرونده ها ی اداره کار
  • بررسی موانع و علل تأخیر در رسیدگی پرونده ها ی اداره کار کارگر قانون کار امنیت شغلی هیأت حل اختلاف اداره کار و امور اجتماعی کارفرما دیوان عدالت اداری دانلود مقالات رشته حقوق دانلود مقالات حقوقی سیستم همکاری در فروش…

  • مبانی نظری الگوی رضایت شغلی بر مبنا فرسودگی شغلی در زنان شاغل
  • مبانی نظری الگوی رضایت شغلی بر مبنا فرسودگی شغلی در زنان شاغل کلمات کلیدی : تعارض کار و خانواده مولفه هاي فرسودگي شغلي مولفه هاي تعارض كار و خانواده تعارض کار - خانواده و مولفه های تاثیر پذیر از آن…

  • مطالعه سینتیک هیدروژن زدایی پروپان و واکنش های جانبی با کاتالیزور پلاتین، قلع/اکسید آلومینیوم (Al2O3)
  • مطالعه سینتیک هیدروژن زدایی پروپان و واکنش های جانبی با کاتالیزور پلاتین، قلع/اکسید آلومینیوم (Al2O3) طالعه سینتیک هیدروژن زدایی پروپان و واکنش های جانبی با کاتالیزور پلاتین، قلعاکسید آلومینیوم (Al2O3) رفتن به سایت اصلی نمونه ترجمه چکیدهسینتیک واکنشهای درگیر در…

  • قاچاق كالا و ارز
  • قاچاق كالا و ارز دانلود مقالات رشته اقتصاد قاچاق كالا و ارز دانلود مقاله قاچاق كالا و ارز اقتصاد پنهان بحران اقتصادی دانلود مقالات اقتصاد خرید مقالات اقتصاد فروش تحقیق رفتن به سایت اصلی دانلود مقاله رشته اقتصاد قاچاق كالا و…

  • مقاله رشته علوم سیاسی با عنوان مجلس شورای اسلامی
  • مقاله رشته علوم سیاسی با عنوان مجلس شورای اسلامی نمایندگان مجلس پیشینه مجلس در ایران مجلس شورای اسلامی دانلود مقاله رشته علوم سیاسی با عنوان مجلس شورای اسلامی تعریف مجلس شورای اسلامی وظایف و اختیارات و محدودیت‌های مجلس شرایط داوطلبین…

  • قانون داوری تجاری بین‌المللی ایران همسو با قانون نمونه داوری آنسیترال
  • قانون داوری تجاری بین‌المللی ایران همسو با قانون نمونه داوری آنسیترال داوری تجاری داوری تجاری بین‌المللی قانون داوری تجاری بین‌المللی قانون داوری تجاری بین‌المللی ایران قانون نمونه داوری آنسیترال مقاله قانون داوری تجاری بین‌المللی ایران مقاله قانون نمونه داوری آنسیترال…

  • ارزیابی ارتباط اخلاق ترافیک شهروندی و تخلفات رانندگی
  • ارزیابی ارتباط اخلاق ترافیک شهروندی و تخلفات رانندگی اخلاق شهروندی اخلاق ترافیک شهروندی پایان نامه میزان تخلفات رانندگی پایان نامه اخلاق شهروندی پایان نامه اخلاق ترافیک شهروندی اخلاق ترافیك شهروندان اخلاق ترافیك شهروندی در بین رانندگان شهری عوامل موثر بر…

  • روابط ساختاری بین خدمات گرایی سازمانی، رضایت شغلی كارمند صف و رفتار شهروندی سازمانی
  • روابط ساختاری بین خدمات گرایی سازمانی، رضایت شغلی كارمند صف و رفتار شهروندی سازمانی رضایت شغلی سازمانهای خدمت محور رفتار شهروندی سازمانی رضایت شغلی كارمندان مقاله در مورد رضایت شغلی مقاله در مورد رضایت شغلی کارکنان مقاله در مورد رضایت…

  • ادله اثبات دعوی در قوانین ایران و مصر
  • ادله اثبات دعوی در قوانین ایران و مصر ادله اثبات دعوی ادله اثبات دعوی در قوانین ایران ادله اثبات دعوی در قوانین مصر پایان نامه ادله اثبات دعوی ادله اثبات كیفری ادله اثبات كیفری در قانون جزای ایران ادله اثبات…

  • چارچوب نظری و پیشینه پژوهش تعهد سازمانی
  • چارچوب نظری و پیشینه پژوهش تعهد سازمانی مبانی نظری تعهد سازمانی دانلود مبانی نظری تعهد سازمانی پیشینه تحقیق تعهد سازمانی ادبیات نظری تعهد سازمانی فصل دوم پایان نامه تعهد سازمانی مبانی نظری و پیشینه تحقیق تعهد سازمانی ادبیات و مبانی…

  • پرسشنامه استاندارد توسعه منابع انسانی تونکه نژاد و داوری 1388
  • پرسشنامه استاندارد توسعه منابع انسانی تونکه نژاد و داوری 1388 کلمات کلیدی : پرسشنامه توسعه نیروی انسانی دانلود پرسشنامه توسعه منابع انسانی پرسشنامه ابعاد توسعه منابع انسانی پرسشنامه استاندارد توسعه منابع انسانی پرسشنامه آموزش و توسعه منابع انسانی پرسشنامه توسعه…

  • تاثیر تحصیل بر نگرش افراد نسبت به اینترنت با مدل سنجش نگرش اینترنتی
  • تاثیر تحصیل بر نگرش افراد نسبت به اینترنت با مدل سنجش نگرش اینترنتی پایان نامه سنجش نگرش اینترنتی مدل سنجش نگرش اینترنتی سنجش نگرش اینترنتی دانشجویان پایان نامه نگرش دانشجویان نسبت به اینترنت سنجش نگرش افراد نسبت به اینترنت اضطراب…

  • پاورپوینت استاندارد حسابداري شماره 2 (صورت جريان وجوه نقد)
  • پاورپوینت استاندارد حسابداري شماره 2 (صورت جريان وجوه نقد) دانلود رایگان پاورپوینت استاندارد حسابداري شماره 2 (صورت جريان وجوه نقد) پاورپوینت استاندارد حسابداري شماره 2 استاندارد حسابداري شماره دو پاورپوینت استاندارد حسابداري شماره 2 (صورت جريان وجوه نقد) دانلود رایگان…

  • الزامات و شاخصهای توسعه شهری پایدار و نقش برنامه ریزان شهری در این عصر
  • الزامات و شاخصهای توسعه شهری پایدار و نقش برنامه ریزان شهری در این عصر شهر پایدار توسعه پایدار شهر اکولوژیک توسعه شهری پایدار محیط زیست شهری توسعه پایدار شهری دانلود پایان نامه مدیریت و برنامه ریزی شهری دانلود پایان نامه…

  • پرسشنامه بررسی ارتباط بین رهبری فرآیند توزیع با تلاش های بازاریابی و عملكرد كانال های توزیع
  • پرسشنامه بررسی ارتباط بین رهبری فرآیند توزیع با تلاش های بازاریابی و عملكرد كانال های توزیع پرسشنامه تلاش های بازاریابی پرسشنامه عملكرد كانال توزیع پرسشنامه قیمت گذاری پرسشنامه رهبری خرده فروشی پرسشنامه رهبری كانال توزیع رفتن به سایت اصلی دانلود پرسشنامه پایان…

    پاسخی بگذارید

    نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *